無(wú)菌凈化實(shí)驗室生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實(shí)驗材料時(shí),用來(lái)保護操作者本人、實(shí)驗室環(huán)境以及實(shí)驗材料,使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。但是也有幾個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題是需要注意的:
1、紫外燈
生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話(huà),應該每周進(jìn)行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
2、明火
在生物安全柜內所形成的幾乎沒(méi)有微生物的環(huán)境中,應避免使用明火。
3、溢出
實(shí)驗室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗室操作規則,每一位使用實(shí)驗室的成員都要閱讀并理解這些規程。
4、認證
在安裝時(shí)以及每隔一定時(shí)間以后,應由有資質(zhì)的專(zhuān)業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說(shuō)明對每一臺生物安全柜的運行性能以及完整性進(jìn)行認證,以檢查其是否符合國家及國際的性能標準。
5、清潔和消毒
由于剩余的培養基可能會(huì )使微生物生長(cháng)繁殖,因此在實(shí)驗結束時(shí),包括儀器設備在內的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染,并移出安全柜。
6、清除污染
生物安全柜在移動(dòng)以及更換過(guò)濾器之前,必須清除污染。
7、個(gè)體防護裝備
在使用生物安全柜時(shí)應穿著(zhù)個(gè)體防護服。
8、警報器
可以在兩種警報器中選擇一種來(lái)裝備生物安全柜。
分類(lèi)
生物安全柜可分為一級、二級和三級三大類(lèi)以滿(mǎn)足不同的生物研究和防疫要求。
一級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實(shí)驗室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器。所有類(lèi)型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過(guò)濾器。一級生物安全柜本身無(wú)風(fēng)機,依賴(lài)外接通風(fēng)管中的風(fēng)機帶動(dòng)氣流,由于不能對試驗品或產(chǎn)品提供保護,目前已較少使用。
二級生物安全柜是目前應用尤為廣泛的柜型。與Ⅰ級生物安全柜一樣,Ⅱ級生物安全
柜也有氣流流入前窗開(kāi)口,被稱(chēng)作“進(jìn)氣流",用來(lái)防止在微生物操作時(shí)可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全柜不同的是,未經(jīng)過(guò)濾的進(jìn)氣流會(huì )在到達工作區域前被進(jìn)風(fēng)格柵俘獲,因此試驗品不會(huì )受到外界空氣的污染。Ⅱ級生物安全柜的一個(gè)*之處在于經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下,被稱(chēng)作“下沉氣流"。下沉氣流不斷吹過(guò)安全柜工作區域,以保護柜中的試驗品不被外界塵?;蚣毦廴?。
按照NSF49的中的規定,二級生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)級別:A1型,A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。
A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區,30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區,30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。A2型安全柜的負壓環(huán)繞污染區域的設計,阻止了柜內物質(zhì)的泄漏。
二級B型生物安全柜均為連接排氣系統的安全柜。連接安全柜排氣導管的風(fēng)機連接緊急供應電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負壓,以免危險氣體泄漏如實(shí)驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。B1型70%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器排除,30%的氣體通過(guò)供氣口HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區。B2型為全排型安全柜,無(wú)內部循環(huán)氣流,可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制。
三級生物安全柜是為4級實(shí)驗室生物安全等級而設計的,是高安全防護等級的安全柜。柜體*氣密,全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過(guò)連接在柜體的手套進(jìn)行操作,俗稱(chēng)手套箱(Golvebox),試驗品通過(guò)雙門(mén)的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險的生物試驗。
在允許循環(huán)化學(xué)氣體的操作條件下,可以使用外接排放管道蓋(ExhaustCollar)的A2型二級生物安全柜。排放管道蓋與一般硬管不同的是有可吸入空氣的進(jìn)氣孔;排放管道蓋與外排管道連接,然后接到一個(gè)外排風(fēng)機。排放管道蓋上的進(jìn)氣孔對于A2型二級生物安全柜通過(guò)內置風(fēng)機保持進(jìn)氣流和下沉氣流的平衡至關(guān)重要。如果使用密封的外接風(fēng)管,進(jìn)氣流將會(huì )過(guò)強可能導致安全柜對產(chǎn)品的保護實(shí)效;而排放管道蓋上的進(jìn)氣孔可以從室內吸入空氣,而不會(huì )影響安全柜內的氣流平衡。此條件只適用于微量有毒化學(xué)物質(zhì)。
如果不允許循環(huán)化學(xué)氣體,則必須使用裝備硬管的B2型二級生物安全柜。由于B型安全柜不是獨立平衡系統,它的內置風(fēng)機只能制造下沉氣流,安全柜依賴(lài)外排風(fēng)機制造進(jìn)氣流。這種型號的安全柜在安裝和維護時(shí)會(huì )較為復雜,因為外排風(fēng)機必須與內置風(fēng)機保持平衡,否則將導致對操作人員或產(chǎn)品的安全性能的失效。
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